1

+7(727) 227-36-36

Стандартные правила микробиологического исследования мочи

Автор: Д.Уразбаева - Доктор медицинских наук, заместитель исполнительного директора Hak medical по вопросам лаборатории г.Алматы, Виткаускиене А.

В настоящее время остро встает вопрос о качестве медицинской помощи, в том числе диагностического лабораторного анализа. Для достижения достоверного качественного результата нужна стандартизация всех процессов исследования. Имеющаяся в Республике Казахстан нормативная база, касающаяся бактериологической диагностики, далека от совершенства, не учитывает современного развития технологий и не устраивает клинических микробиологов. Поэтому с позиций доказательной медицины актуальным является разработка стандартных процедур подготовки и проведения исследования.

Инфекции мочевого тракта занимают по распространенности одно из ведущих мест, встречаются у людей различного возраста, нередко приводят к осложнениям и хронизации. Эту патологию могут вызывать различные микроорганизмы. В норме моча является стерильной жидкостью, однако в дистальную часть уретры могут попадать бактерии с кожи, из половых органов и кишечника, что осложняет постановку правильного диагноза.
Инфекции мочевыводящих путей могут вызывать стафилококки, энтерококки, энтеробактерии, псевдомонады, микобактерии, микоплазмы, а иногда Candida albicans (1, 2, 3, 4).
Микробиологическое исследование является достаточно сложным, предъявляя строгие требования к сбору, хранению, транспортировке, выполнению исследования.

Пробы мочи могут быть получены с помощью цистоскопии, надлобковой пункции мочевого пузыря или катетеризации. Самым точным является второй способ, который подходит для младенцев и больных, которым нельзя объяснить, каким образом собирать мочу. Катетеризация мочевого пузыря может привести к заносу инфекции, поэтому необходимо избегать этого метода забора материала.

Чаще всего исследованию подлежит средняя порция утренней мочи. Существуют специальные рекомендации забора для избегания загрязнения пробы мочи микрофлорой кожи, уретры или влагалища. Биологический материал собирается в одноразовые контейнеры для мочи, срочно отправляется в лабораторию (в течение 1 часа после сбора).
Основными этапами исследования является:

1. Микроскопия

Фазово-контрастная или световая микроскопия окрашенного по Граму мазка. Определяется количество микроорганизмов, лейкоцитов и клеток плоского эпителия, оцениваются тинкториальные свойства микроорганизмов.
Ориентировочное соответствие первичной микроскопии и бактериурии (при использовании увеличения в 1000 раз):
1-3 микроорганизма в поле зрения – 105 микр/мл;
10-30 микроорганизмов в поле зрения – 106 микр/мл;
> 30 микроорганизмов в поле зрения - >106 микр/мл. Подчеркнем, что в мазке мочи здорового человека допускается наличие лишь нескольких бактериальных клеток или лейкоцитов. В мазках мочи, взятой у женщин, большое число слущенного эпителия независимо от того, обнаружены или не обнаружены бактерии, свидетельствует о контаминации мочи влагалищной микрофлорой, в связи с чем необходимо повторение анализа (1).

2. Бактериологическое исследование

Для рассева используются стандартные стерильные петли из полистирола 1 мкл и 10 мкл. Среды выбираются, исходя из результатов микроскопии.

Техника рассева мочи:
1. Петлю 1 мкл погрузить в контейнер с мочой, перемешать и одну каплю поместить на чашку Петри с 5% кровяным агаром, прочертив ею весь диаметр чашки.
2. Поперечными движениями рассеять мочу по всей чашке.
3. Повторно взять каплю мочи и тем же методом рассеять ее на половину чашки Петри с агаром Endo или MacConkey.
4. Вторую половину среды с агаром Endo или MacConkey рассеять петлей 10 мкл.
Инкубировать при температуре 35°С.

Если результаты посева не соответствуют результатом первичной микроскопии или моча взята методом инвазивных процедур, инкубация продлевается до 48 часов.

Таблица 1 - Интерпретация роста бактерий на плотных питательных средах
 
Рост на 5% кровяном агаре
Результат
Менее 6 колоний
< 10³ КОЕ/мл
6 – 60 колоний
104 – 105 КОЕ/мл
>60 колоний
> 105 КОЕ/мл
 
Дальнейшая работа с посевами мочи зависит способа забора материала, пола пациента, клинической картины заболевания.

 

Таблица 2 — Порядок работы с посевом мочи после оценки количества выросших микроорганизмов
 
Число колоний/мл
Клинические данные и методы сбора мочи
Микроорганизмы
Дальнейшая последовательность оценки
10²
Женщины с признаками инфекции мочевых путей
Чистая культура грамотрицательных палочек
ИД*, провести АБЧ**
10²
Надлобковый аспират мочевого пузыря
Все выделенные микроорганизмы
ИД*, провести АБЧ**
10³
Взятая катетером моча у мужчин с признаками инфекции мочевых путей
Чистая культура возможных патогенных микроорганизмов
ИД*, провести АБЧ**
104
Взятая катетером моча
1.    Две культуры возможных патогенных микроорганизмов
2.    Три и более культуры
ИД*, провести АБЧ**
 
 
 
Повторить анализ
105
Средняя порция мочи
1.     Чистая культура возможного патогенного микроорганизма
2.     Культуры двух возможных патогенных микроорганизмов
3.     Более двух культур
ИД*, провести АБЧ**
 
 
 
ИД*, провести АБЧ**
 
 
 
 
Повторить анализ
 
* ИД – идентификация
**АБЧ - определение антибиотикочувствительности
 
В течение долгого времени считалось, что только 105 КОЕ микроорганизмов в 1 мл средней порции  мочи являлось признаком инфекции мочевых путей. Некоторые авторы утверждают, что 10КОЕ/мл или даже меньшее количество микроорганизмов  также показывают наличие инфекции мочевых путей. Другие считают, что очень важный показатель инфекции – наличие полиморфонуклеаров в моче. Известны случаи, когда в моче пациентов устанавливается очевидная бактериурия, хотя симптомы болезни и отсутствуют (3, 5).
Невозможно четко определить количество бактерий в 1 мл мочи, которое бы бесспорно доказало наличие инфекции мочевых путей, также наличие лейкоцитов в моче нельзя считать бесспорным доказательством инфекции.
Поэтому важно чтобы клиницист, оценивая результаты бактериологического исследования мочи, сопоставлял  клинические и другие имеющиеся данные, сотрудничал  с микробиологом.
Послеидентификации  бактерий, определения их чувствительности к антибиотикам выдается результат исследования с указанием количества микроорганизмов в 1мл мочи (общее микробное число).
 
Отрицательный результат исследования выписывается в случае: 
Если моча была взята катетером или из средней порции мочи и через 18 – 24 часа на твердых питательных средах не наблюдается рост микроорганизмов.
Если через 48 часов нет роста микроорганизмов из образцов, взятых инвазивно (к примеру, пункцией мочевого пузыря).
 
Список литературы 
1. Митрохин С.Д. Микробиологическая диагностика урогенитальных инфекций. - Consilium Medicum. - 2005. - Т. 11, N 3.
2. Моисеев С. В. Практические рекомендации по антибактериальной терапии и профилактике инфекций мочевыводящих путей с позиций доказательной медицины // Инфекции и антимикробная терапия. - 2003. - Т. 5, № 3.
3. Пашкевич Д. Д., Арутюнов А. Г., Арутюнов Г. П. Клиническое значение асимптоматической бактериурии // Сердечная недостаточность. - 2010. - Т. 11, № 4 (60). - С. 245–248.
4. Рафальский В. В., Страчунский Л. С., Бабкин П. А. и соавт. Резистентность возбудителей неосложненных инфекций мочевых путей в России // Урология.- 2006, - № 5. -  С. 34–37.
5.  Лернер С. Необходимы ли посевы мочи для начала антибиотикотерапии инфекций мочевыводящих путей? Что является подходящей стартовой терапией? - КМАХ. - 2000. - № 3. 

Вернуться назад

Комментарии

Оставить комментарий

Пресс-центр