+7(727) 227-36-36

Идентификация дрожжевых грибов при помощи integral system yeasts plus в диагностике кандидозов верхних дыхательных путей

Автор: Д.Уразбаева - Доктор медицинских наук, заместитель исполнительного директора Hak medical по вопросам лаборатории г.Алматы,С.К. Бисимбаева, Н.В. Калина, Б.Д. Бекибаева

Аннотация

В результате проведенного микробиологического исследования биоматериала, взятого при заболеваниях ЛОР-органов проведено определение спектра дрожжевых грибов и выявление доминирующих видов с использованием диагностической системы «Integral system yeasts plus».
Microbiological studies of biomaterial made at diseases held definition of yeast fungi and identification of dominant species using diagnostic system «Integral system yeasts plus.

Ключевые слова: кандидоз верхних дыхательных путей, Integral system yeasts plus, идентификация и определение антимикотикочувствительности Введение. Заболевания, вызываемые дрожжевыми грибами, представляют одну из проблем современной медицины. В настоящее время выявлен ряд факторов, предрасполагающих к возникновению кандидоза верхних дыхательных путей (ВДП) у взрослых и детей, но основными являются предшествующая длительная терапия антибактериальными антибиотиками, системные и другие заболевания слизистых оболочек, сопровождающиеся их повреждением [2, 3].
Дрожжевые грибы относятся к оппортунистическим микроорганизмам. Они обычно слабовирулентны и не способны вызывать инвазивные микозы у пациентов без нарушения защитных барьерных функций организма [1]. Проблема выявления и лечения кандидозов в оториноларингологии приобретает всё большее значение по ряду причин: широкое распространение, более тяжелое течение данной патологии, изменение спектра микобиоты и рост резистентности микромицетов к антимикотическим препаратам [5, 6].
Для эффективной терапии микозов ВДП необходимым условием является проведение видовой идентификации и определение чувствительности возбудителей к противогрибковым препаратам [4, 6].
Цель работы. Целью нашего исследования является определение спектра дрожжевых грибов, выделяемых из клинических материалов от пациентов с заболеваниями ВДП, выявление доминирующих видов. Материалы и методы исследования. Нами произведено микробиологическое обследование 1525 пациентов с заболеваниями ВДП, находившихся на обследовании и лечении в АО «Республиканский диагностический центр» (АО «РДЦ»), г. Астаны в 2010-2011гг. Забор материала производился до начала антибактериальной и антимикотической терапии. Транспортировка осуществлялась в течение 2-3 часов в пробирке с транспортной средой. Для выделения грибов из патологических материалов использовали стандартные методики микробиологического исследования. После получения чистой дрожжевой культуры на агаре Сабуро проводили дальнейшую идентификацию с использованием системы «Integral system yeasts plus» (производство «Liofilchem s.r.l.», Италия), представляющая собой 24 луночную систему, содержащую высушенные биохимические и антимикотические субстраты для детекции наиболее клинически важных дрожжей (рис.1).

Рис. 1. Выделение Cryрtococcus laurentii на Integral system yeasts plus (производство «Liofilchem s.r.l.», Италия)

Integral system yeasts plus – одноразовая система, которая используется только для in vitro диагностики. Используемая система позволяет определить 31 вид дрожжевых грибов. Детекция основывается на реакциях ассимиляции сахаров, которые интерпретируются оценкой изменения цвета в лунках. В тестах используется 12 биохимических тестов, которые разделены на 4 группы, содержащих по 3 теста и каждый тест определяется позитивными значениями 1, 2, 4. Комбинация позитивных и негативных реакций позволяет сформировать цифровой код, которая дает возможность идентифицировать исследуемые дрожжи с помощью прилагаемой таблицы кодов. Помимо этого определяли наличие образования ростковых трубок и морфологию (образование гиф, псевдогиф, бластоконидий, хламидоспор, артроспор) на рисовом агаре.
Результаты и обсуждение. Микробиологическое исследование биоматериала, взятого при заболеваниях ЛОР органов показало, что из 1525 проб в 1403 случаях (92,0%) результаты положительны. У 122 бследованных
(8,0%) выделялись дрожжевые грибы. Больные распределены по нозологическим формам следующим образом: ларингомикоз – 40 (32,8%), фарингомикоз – 58 (47,5%), фаринголарингомикоз – 19 (15,6%), грибковый риносинусит – 5 (4,1%) (рисунок 2).

 

 

Рис. 2. Нозологическая структура микозов ВДП

Доминирующими видами при ларинго- и фарингомикозах являются Candida albicans. Причиной грибкового риносинусита явился Trichosporon pullulans. Часто инфекция была вызвана разными штаммами C. albicans в сочетании с различными бактериями. Большинство этих изолятов составили C. famata, C. Tropicalis и C. parapsilosis, причем доля видов, не относящихся к C. albicans, доходила в среднем до 57%. Случаи выявления других родов дрожжей, таких как Cryрtococcus и Saccaharomyces в изучаемой популяции составили 13,2% и 10,0% соответственно. У одного пациента причиной микоза явилась Rodotorula rubra. Основным возбудителем микозов явилась C. albicans, которую обнаружили у 47,0% пациентов.
Таким образом, использование тест-метода в диагностике микозов ЛОР органов позволяет одновременно проводить идентификацию и определение антимикотикочувствительности выделенных грибов, что сокращает сроки выдачи результата. Кроме того, информация, получаемая при тестировании дрожжевых грибов, может быть использована для уточнения таксономического положения микроорганизмов.

Выводы:

1. Integral system yeasts plus является современным доступным стандартным методом идентификации дрожжевых грибов, которую необходимо внедрить в практику лабораторной клинической микробиологии.
2. При фаринголарингомикозах ведущим этиологическим агентом в нашем регионе является C.albicans.

Литература

1. Тастанбекова Л.К. Видовой спектр и биологические свойства плесневых грибов при микозах ЛОР- органов: автореф. дис ...канд.мед.наук: 03.00.07/ Л.К. Тастанбекова, Казах. нац. мед. ун-т. - Алматы,2004.- 29с.
2. Буркутбаева Т.Н. Диагностика и лечение микотических поражений верхних дыхательных путей, вызванных мицелиальными микромицетами// Рос. оториноларингология. – 2005.-№3.- С.40-43.
3. Профлорцентр РМАПО [Электронный ресурс] / Микотическая инфекция и антифунгальный иммунитет при оториноларингологической патологии / Арефьева Н.А.[и др.] Режим доступа: http:// - http://www.lorcentr.ru/ - Дата доступа: 05.01.2009
4. Vennewald I., Hencer M., Klemm E., Seebacher C. Fungal colonization of paranasal sinuses // Mycoses. – 1999. -- № 42, Suppl.2. – P.33-36.
5. Аравийский, Р.А Диагностика микозов/ Р.А. Аравийский, Н.Н. Климко, Н.В.Васильева – СПб: Издательский дом СПбМАПО, 2004. – 186с.
6. Елинов, Н.П. Аспергиллёзная инфекция: подходы к диагностике и лечению/ Н.П. Елинов, В.С. Митрофанов, Р.М. Чернопятова // Проблемы медицинской микологии. – 2002. – Т.4.-№1.-С.1-14. 

Вернуться назад

Комментарии

Оставить комментарий

Пресс-центр